猪瘟伪狂犬病重组病毒sa215（a）株的构建及生物学特性研究

？采用磷酸钙转染系统，将伪狂犬病三基因缺失疫苗sa215株dna与pp63lacze2dna共转染vero细胞，获得sa215（a）1、sa215（a）2和sa215（a）3等12个重组病毒株。以光生物素标记的hcve2基因为探针进行初步鉴定后，挑选sa215（a）1株作bamhi酶切和southern转印杂交鉴定，结果表明构建是成功的，将其命名为sa215（a）。直接荧光抗体检测、sds-page电泳和western免疫印迹检测结果表明hcve2基因在重组病毒内获得表达，产生大小约51ku的囊膜糖蛋白。对sa215（a）株进行部分生物学特性研究，培养特性观察试验表明该毒株可适应vero、bhk21和鸡胚成纤维细胞等多种细胞，但对不同细胞系表现有一定的差异。sa215（a）株105pfu/ml接种21日龄健康仔猪（伪狂犬病和猪瘟检测阴性），接种后28d用106pfu的prvfa强毒株滴鼻攻毒，42d用猪瘟sm株血毒1ml（105mld/ml）肌肉注射攻击，结果表明接种猪能抵御2次病毒攻击，表明sa215（a）株具有良好免疫原性，是一株优秀的猪瘟、伪狂犬病二价疫苗候选株。