番鸭呼肠孤病毒mw9710σc蛋白基因克隆及其在e.coli中表达

？应用rt-pcr扩增出番鸭呼肠孤病毒mw9710株的σc基因，序列分析表明σc基因核苷酸数为810bp，编码269个氨基酸，相对分子量为29.4ku，dnastar软件分析mw9710株的σc核苷酸序列和法国番鸭呼肠孤病毒89026株有93%的同源性，而与禽呼肠孤病毒的同源性仅在21%～25%之间，表明番鸭呼肠孤病毒是一类不同于禽呼肠孤病毒的新病毒。将σc基因片段亚克隆到原核表达载体pet32a中，经iptg诱导后在大肠杆菌bl21(de3)中得到高效表达，western-blot进一步验证了表达产物与番鸭呼肠孤病毒阳性血清反应，表明σc基因表达产物具有免疫原性，为下一步研制番鸭呼肠孤病毒诊断试剂盒和基因工程疫苗奠定基础。