鸡il-18cdna的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

？运用rt-pcr方法，从经脂多糖（lps）诱导的鸡马立克氏病成淋巴细胞样细胞系mdccmsb1总rna中扩增得到了鸡白细胞介素18（chickeninterleukin18,chil-18）成熟蛋白基因的cdna，并将其克隆到pmd18-t载体上。dna序列测定表明，克隆得到的chil18cdna与国外报道的完全一致，包括终止密码子在内其编码区的长度为510bp,编码169个氨基酸残基的蛋白质。将chil-18成熟肽段编码区定向克隆到原核表达载体pgex-6p-1中谷胱甘肽转移酶（gst）基因的下游，构建成原核表达质粒pgex-chil18。该质粒的bl21（de3）lyss转化菌在iptg的诱导下可高效表达gst-chil18基因融合蛋白，表达量约占菌体总蛋白的32%。