山羊乳腺上皮细胞的分离、培养与超微结构观察

？从山羊乳腺取部分组织进行细胞培养，并通过控时消化分离纯化山羊乳腺上皮细胞，建立了山羊乳腺上皮细胞系。结果表明：用含150u/mli型胶原酶和100u/ml透明质酸酶的混合液，37℃消化组织块4h，可得到大量的分散单细胞用于原代培养，该法是获得山羊乳腺组织单细胞的适宜方法；以含10%胎牛血清和双抗的rpmi1640或deme/f12培养液为基础液，在培养液中添加氢化考的松、胰岛素样生长因子-i(igf-i)、表皮生长因子(egf)及胰岛素-转铁蛋白-硒钠(its)对山羊乳腺上皮细胞的生长具有较明显的促进作用。上皮细胞显微和超微结构显示：山羊乳腺上皮细胞在体外培养过程中可形成岛屿状单层聚集和类似圆顶状的结构；传代培养到第7代的细胞仍增殖旺盛，细胞内有丰富的脂滴和高尔基小泡，细胞分泌活动旺盛。