鉴别牛早期胚胎性别pcr方法引物的设计与筛选

？根据牛y-染色体特异重复序列、睾丸特异蛋白基因以及性别决定基因序列设计合成5对公牛y-染色体特异引物，依据牛骨胳肌α肌动蛋白前体基因和微卫星dna序列设计合成4对牛dna特异引物（内标引物）。单重pcr扩增牛基因组dna，筛选出4对牛y-染色体特异引物和1对牛dna特异内标引物。将不同的y-染色体特异引物与内标引物组合，多重pcr扩增牛基因组dna、已知性别的牛成纤维细胞和克隆胚胎，筛选出2个可用于牛早期胚胎性别鉴别的pcr引物组合：b34/a12和b78/a12。