非洲马瘟病毒vp7基因拼接、表达及重组elisa方法的建立与初步应用

？采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒(ahsv)含有绝大多数线性抗原表位的vp7编码基因片段，克隆于pet-30a构建重组质粒pet-30a-vp7，将pet-30a-vp7转化bl21(de3)，经1.0mmol/liptg诱导，外源基因以包涵体的形式获得高效表达。通过dot-elisa以及elisa试验证明表达产物具有良好的反应原性。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测ahsv抗体的间接elisa方法。结果表明，抗原的最佳包被浓度为0.25μg/ml，血清的最佳稀释度为1∶40，待检血清阳性临界值初步定为0.25。用此方法和商品化elisa试剂盒检测了184份血清样品，结果完全符合。