猪附红细胞体pcr-微孔板杂交-酶免疫检测方法的研究

？以猪附红细胞体和多种血营养菌的16srrna基因的保守区设计合成引物hm-f/hm-r，在反向引物的5'端用生物素标记，以猪附红细胞体广东株16srrna基因的可变区序列设计种特异性寡核苷酸探针，探针的5'端用地高辛标记，成功地建立了猪附红细胞体pcr-微孔板杂交-酶免疫法检测方法。通过测定不同浓度pcr产物对应的微孔板杂交-酶反应显色od值，用spss统计软件进行回归分析，得到回归方程为y=2.1012-0.4492×log(x)，其相关系数r为0.977，显示对未知样品可进行定量检测。该方法与猪的多种细菌性病原、猫血巴尔通氏体ca株和e.wenyonii无交叉反应，其敏感性比常规pcr琼脂糖电泳检测提高了近100倍。应用实验建立的方法，对38份临床样品进行检测，结果有12份检测结果为阳性。