猪脑心肌炎病毒的分离与鉴定

？从规模化猪场疑似病例组织病料中分离到5株脑心肌炎病毒（emcv），对其中的2株（emcvbjc3和emcvhb1）进行了系统鉴定。结果表明，病毒粒子大小约为27nm，呈圆形；2株病毒均不耐酸，对氯仿不敏感，对胰蛋白酶敏感性有所不同，60℃加热1h可被灭活，二价阳离子对病毒没有明显的保护作用。用emcv多克隆抗体作间接免疫荧光，分离毒株感染的bhk21细胞的胞浆中可见特异性荧光。对分离毒株进行了vp1和3d基因的扩增和序列测定，结果表明，2个毒株vp1基因的核苷酸序列同源性为99.49%，氨基酸序列的同源性为98.46%，与genbank中emcv毒株的核苷酸序列同源性介于81.61%～99.59%，氨基酸序列同源性在95.5%以上；3d基因扩增片段序列与其它毒株的核苷酸与氨基酸序列同源性均为100%。基于vp1基因的系统进化树表明，2株分离毒均位于进化树的主干上，变异度不大。由此表明，emcv感染已在我国猪场存在。