表达h5n1亚型猪流感病毒ha基因重组腺病毒的构建及其免疫原性

？rt-pcr扩增猪流感病毒a/swine/fujian/1/2001(h5n1)株的ha基因，构建重组腺病毒穿梭质粒pdc315h5haegfp。采用admax同源重组系统和共转染技术，构建了表达h5n1亚型猪流感病毒ha基因的复制缺陷型重组腺病毒（radh5haegfp）。经目的基因pcr检测及序列测定，结果表明：ha基因已经正确地插入到腺病毒的基因组中；通过rtpcr检测与westernblot分析，结果表明：ha基因能够进行正确转录，并且所表达的蛋白具有相应的生物学活性。子代重组腺病毒radh5haegfp经增殖、纯化后感染性滴度可达2.26×1010tcid50ml1。radh5haegfp免疫balb/c小鼠能够诱导特异性的hi抗体产生，有效阻止病毒在体内的复制。