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牲畜兽医学报 2013
ghrelin参与fsh对牛卵丘细胞体外增殖的调节, PP. 1236-1243 Keywords: 牛卵丘细胞,增殖,fsh,ghrelin,实时定量pcr Abstract: ??为了解牛卵丘-卵母细胞复合体(cocs)体外成熟过程中ghrelin对卵丘细胞增殖的可能调节及其与促卵泡素(follicle-stimulatinghormone,fsh)在卵丘细胞增殖过程中可能的调控关系,本研究运用实时定量rt-pcr技术首先检测了体外不同成熟时间(0、8、16和24h)牛卵丘细胞中ghrelinmrna的相对表达差异,然后在体外成熟8h,探讨了fsh与fsh受体结合抑制剂(fshbindinginhibitor,fshbi)对ghrelinmrna表达的影响,以及fsh与ghrelin受体抑制剂([d-lys3]-ghrp-6)对增殖相关基因pcna,bcl-2和baxmrna表达可能的调节作用;最后利用细胞增殖活性测定技术检测了fsh与[d-lys3]-ghrp-6对卵丘细胞增殖活性的影响。结果显示:(1)ghrelinmrna相对水平在体外成熟8h卵丘细胞中最高,显著高于0和24h组(p<0.05);(2)0.01iu·ml-1fsh添加组与对照组相比,ghrelinmrna表达显著升高(p<0.05);在添加400ng·ml-1fshbi后,ghrelinmrna表达下降且差异显著(p<0.05);(3)添加fsh后,pcna和bcl-2mrna表达以及卵丘细胞增殖活性显著升高(p<0.05);添加[d-lys3]-ghrp-6后,上述基因表达水平与增殖活性显著降低(p<0.05)。上述结果表明,ghrelin参与fsh对体外成熟过程卵丘细胞增殖的调节,本研究结果有助于进一步了解fsh调控卵泡发育的机制。
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