甲状腺激素受体α在猪有腔卵泡发育和孤雌激活胚胎发育过程中表达模式

？本研究旨在探讨猪不同发育时期的卵泡甲状腺激素受体α（trα）蛋白的表达规律，以及体外培养猪卵母细胞和早期胚胎中trα的表达模式。采用化学发光免疫分析法（clia）测定了不同直径大小猪卵泡甲状腺激素（ths）的含量，运用免疫组化法对猪卵巢trα进行定位染色，应用免疫荧光技术和qrt-pcr技术分别检测体外培养猪卵母细胞和孤雌激活早期胚胎trα蛋白的表达定位和trαmrna水平表达变化规律。结果表明：猪卵泡中t3含量随着卵泡直径的增大呈现先下降后上升的趋势。免疫组化染色结果显示，阳性信号主要见于gc、tc及卵母细胞。随着卵泡的发育，trα阳性细胞数量呈增长趋势，原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡之间阳性细胞数量差异显著。qrt-pcr结果显示，猪trα基因在不同成熟培养阶段的cocs均有表达，在孤雌激活早期胚胎1-细胞、2-细胞和4-细胞胚胎期显著高于8-细胞胚胎期、桑椹期和囊胚期（p<0.05）。免疫荧光观察到在猪体外成熟的cocs不同发育阶段颗粒细胞均表达trα蛋白，在24~36h卵丘颗粒细胞表达阳性最强。trα蛋白在猪孤雌激活早期胚胎不同阶段中均有表达，且8-细胞、桑椹胚和囊胚的阳性信号较强。结果提示，不同直径猪卵泡液中均存在ths，不同成熟阶段cocs和早期胚胎中trα均呈现表达，推测ths可能通过与trα结合而参与调控猪卵泡发生和早期胚胎发育。