应用itraq-hplc-ms技术筛选奶牛脂肪肝病尿液蛋白标志物

？应用同位素标记相对和绝对定量(itraq)技术筛选并鉴定脂肪肝病奶牛尿液中的差异表达蛋白，为诊断奶牛脂肪肝病提供新的生物标志物。收集40头奶牛的尿液，分为脂肪肝病组a1、a2和健康对照组b1、b2，每组各10头奶牛。组内每10个样品等量混合后进行试验，将符合要求的样品进行itraq标记后利用高效液相色谱法层析，经串联质谱鉴定。共筛选出110个差异表达蛋白，其中50个表达下调，60个表达上调；通过生物信息学分析得到了4个关键性蛋白：玻连蛋白(vitronectin，vtn)、脂质运载蛋白（lipocalin，lcn2)、凝血酶原(prothrombin，f2)和丛集素(clusterin，clu)。本试验成功筛选出脂肪肝病奶牛尿液中的差异表达蛋白，并鉴定出其中4种与奶牛脂肪肝病存在密切关系的关键性调节因子，如能进一步证实为奶牛脂肪肝病的重要生物标志物，将会为奶牛脂肪肝病的早期检测和诊断提供新的方法。