pcv2通过激活myd88调控体外培养pams分泌il-1β、il-6和il-10

？试验选取6头猪圆环病毒2型（pcv2）和猪繁殖与呼吸综合征病毒（prrsv）抗原、抗体均为阴性的30日龄断奶仔猪，无菌分离肺泡巨噬细胞（ams），分4组进行体外培养：对照组、髓样分化因子88（myd88）干扰组（干扰组）、pcv2感染组（pcv2组）、pcv2感染-myd88干扰组（pcv2-干扰组）。采用小干扰rna(sirna)方法使myd88基因沉默，并分别于培养后0、6、12、24和48h收集细胞及培养上清液。用荧光定量pcr法检测干扰效率，westernblot方法检测细胞内myd88蛋白的表达变化，elisa方法检测培养上清液中il-1β、il-6和il-10的动态变化。结果显示，sirna能使78%的myd88基因沉默，并显著影响其蛋白表达；ams中myd88表达量，pcv2组从6h开始显著升高（p<0.05），pcv2-干扰组与pcv2组相比在12、24、48h差异极显著（p<0.01）。培养后各时间点，pcv2均能明显促进ams分泌il-1β（p<0.01或p<0.05），pcv2-干扰组和pcv2组相比，il-1β的分泌量均显著降低（p<0.05）。pcv2能显著增加感染后6和12hil-6的分泌量（p<0.01），pcv2-干扰组和pcv2组相比，il-6的分泌量在6和12h显著降低（p<0.05）。pcv2明显促进感染后12、24和48hams分泌il-10的能力（p<0.01），pcv2-干扰组和pcv2组相比，il-10的含量在24和48h均极显著的降低（p<0.01）。结果表明，pcv2可引起体外培养的pams分泌il-1β、il-6和il-10发生不同的变化，而myd88是引起这些变化的重要调节因子。