猪带绦虫45w-4bx和tsol18的高效表达及免疫效果研究

？rt-pcr扩增45w-4b和tsol18基因，pcr截去45w-4b基因的n端信号肽和c端疏水氨基酸序列形成45w-4bx。将45w-4bx和tsol18pcr产物分别亚克隆入pgex-4t-1，用iptg诱导表达，取产物进行sds-page和westernblot分析。纯化表达产物制成油佐剂疫苗分别免疫家猪，用25000枚猪带绦虫成熟虫卵进行攻击感染，elisa检测各组的抗体水平，90d后剖检计算各组的减虫率。结果表明，45w-4bx和tsol18基因在大肠杆菌中分别以可溶性和包涵体形式获得高效表达，并能被囊虫病人血清所识别。重组蛋白免疫猪15d血清抗体即为阳性，30d左右达到峰值。2种重组抗原的减虫率均在88%以上，与囊虫粗抗原免疫效果相当。这为进一步研制基于45w-4bx和tsol18的猪囊虫重组基因工程疫苗奠定了基础。