猪流感病毒h3n2亚型的分离鉴定与全基因组序列测定

？通过鸡胚接种、mdck细胞培养、血凝及血凝抑制试验、rt-pcr等方法，笔者在四川首次分离并鉴定了1株既能在鸡胚上稳定传代又能在mdck细胞上稳定产生cpe的h3n2亚型猪流感病毒，命名为a/swine/sichuan/01/2006(h3n2)；ns基因的测序结果表明：该病毒分离株与a/swine/hongkong/4361/99(h3n2)、a/newyork/429/2003(h3n2)、a/queensland/6/2000(h3n2)、a/newsouthwales/4/1999(h3n2)等具有代表性的标准毒株的同源性都达到99%；从mdck细胞中抽提流感病毒基因组进行全基因克隆，构建了11个包含全基因8个基因片段的文库。全基因测序结果表明，a/swine/sichuan/01/2006(h3n2）共8个节段，全基因序列共计13577bp；基于ha、na推导蛋白的无根进化树结果显示，四川分离株与人流感标准株a/queensland/6/2000(h3n2)、a/southaustralia/81/2000(h3n2)有较近的亲缘关系，而与猪流感标准株a/swine/spain/42386/2002(h3n2)的亲缘关系较远。