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牲畜兽医学报 2008
西农萨能羊泌乳高峰期和初期乳腺组织差异表达基因研究, PP. 136-142 Keywords: 西农萨能羊,乳腺组织,抑制性削减杂交,基因差异表达,实时定量pcr Abstract: ?利用抑制性削减杂交和实时定量pcr研究西农萨能羊泌乳高峰期差异表达基因,结果表明成功构建泌乳高峰期和泌乳初期乳腺组织差异表达削减cdna文库,以gapdh为指标检测文库削减效率为25倍,共获得78个阳性克隆,pcr检测插入片段主要分布在150~1000bp,挑选插入片段不等的30个克隆测序,获得25个有效序列,代表18个基因。对文库中所包含的血清淀粉样蛋白a3(saa3),atp结合盒亚家族g成员2(abcg2),心脏型脂肪酸结合蛋白(hfabp)和黄嘌呤脱氢酶(xdh)进行实时定量pcr检测,发现上述4个基因在泌乳高峰期乳腺组织中的表达水平分别是泌乳初期的170,77,163和17倍。结论:构建的消减文库可用于筛选泌乳高峰期差异基因,已鉴定的4个基因很可能是调控产奶量和乳成分变化的候选基因。
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