鸡胚盲肠上皮细胞原代培养与鉴定

？为研究鸡e.tenella的宿主细胞——盲肠上皮细胞体外培养技术，为e.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型，分别用胰蛋白酶法、胶原酶ⅰ法、嗜热菌蛋白酶法、嗜热菌蛋白酶+胶原酶ⅰ法和中性蛋白酶ⅰ+胶原酶？法分离纯化原代鸡胚盲肠上皮细胞，通过测定细胞活力、细胞团块比例、总细胞产量和细胞团块产量，筛选出鸡胚盲肠上皮细胞最佳分离方法，并进行了纯化和培养，对培养细胞进行了鉴定。结果表明：嗜热菌蛋白酶消化、低速离心去除单细胞、差速贴壁除去成纤维细胞，为最佳分离和纯化盲肠上皮细胞的方法；分离纯化的细胞接种后分别于第35天、第1011天进入对数生长期，可存活14d以上；经形态学观察、碱性磷酸酶染色、扫描电镜鉴定为盲肠上皮细胞，所分离的细胞培养至第4、7、11天时上皮细胞比例分别为81.67%、84.33%和72.00%。用该法可获得纯度较高的原代鸡胚盲肠上皮细胞。