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牲畜兽医学报 2009
鸡胚盲肠上皮细胞原代培养与鉴定, PP. 0-1704 Keywords: 盲肠上皮细胞,细胞分离,体外培养,鉴定,鸡胚 Abstract: ?为研究鸡e.tenella的宿主细胞——盲肠上皮细胞体外培养技术,为e.tenella损伤机制及抗球虫药的研究提供体外模型,分别用胰蛋白酶法、胶原酶ⅰ法、嗜热菌蛋白酶法、嗜热菌蛋白酶+胶原酶ⅰ法和中性蛋白酶ⅰ+胶原酶?法分离纯化原代鸡胚盲肠上皮细胞,通过测定细胞活力、细胞团块比例、总细胞产量和细胞团块产量,筛选出鸡胚盲肠上皮细胞最佳分离方法,并进行了纯化和培养,对培养细胞进行了鉴定。结果表明:嗜热菌蛋白酶消化、低速离心去除单细胞、差速贴壁除去成纤维细胞,为最佳分离和纯化盲肠上皮细胞的方法;分离纯化的细胞接种后分别于第35天、第1011天进入对数生长期,可存活14d以上;经形态学观察、碱性磷酸酶染色、扫描电镜鉴定为盲肠上皮细胞,所分离的细胞培养至第4、7、11天时上皮细胞比例分别为81.67%、84.33%和72.00%。用该法可获得纯度较高的原代鸡胚盲肠上皮细胞。
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