鸡致病性大肠杆菌菌毛fimc基因的表达及重组fimc蛋白卵黄抗体的免疫保护效力

？在表达鸡致病性大肠杆菌菌毛fimc基因的基础上，对fimc蛋白卵黄抗体的免疫保护效力进行测定。对鸡致病性大肠杆菌o2血清型菌株fimc基因序列进行扩增，扩增产物克隆至pmd18-t载体并测序。测序结果显示，fimc基因全长657bp，编码218个氨基酸，与人源大肠杆菌fimc基因进行同源性比较，核苷酸序列同源性达97.9%，氨基酸序同源性为96%。从重组质粒pmd18-t-fimc上将fimc基因亚克隆到表达载体质粒pet-30c上，转化大肠杆菌bl21（de3），表达出预期的25ku融合蛋白，采用westernblot对表达产物进行反应原性分析，结果显示fimc融合蛋白具有较好的抗原反应特异性。用表达的fimc蛋白免疫产蛋母鸡，制备fimc高免卵黄抗体。用制备的fimc高免卵黄抗体免疫1日龄健康雏鸡，1d后注射鸡致病性大肠杆菌进行攻毒，结果显示，fimc卵黄抗体免疫组死亡率为40%，对照组分别为60%、70%，证明所制备的fimc蛋白卵黄抗体能在一定程度上抵抗鸡致病性大肠杆菌的攻击。