鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的原核表达及生物学活性分析

？通过pcr方法扩增不含信号肽的鸡gm-csf成熟蛋白基因，克隆至原核表达载体pet-32a（+），构建原核表达质粒p32gm-csf，通过iptg诱导重组鸡gm-csf蛋白表达，经镍离子亲和层析纯化后，用mtt法检测表达重组蛋白的生物学活性，并制备兔抗鸡gm-csf多克隆抗体。结果表明成功地构建了p32gm-csf原核表达质粒,sds-page结果显示表达的重组蛋白约34ku,主要以包涵体形式表达，纯化后得到高纯度目的蛋白。westernblot结果表明，该重组蛋白能与制备的抗鸡gm-csf抗体特异性结合。mtt试验证实,该重组蛋白具有明显增强鸡骨髓细胞增殖的生物学活性；这些研究结果表明，表达的重组chgm-csf蛋白及其多克隆抗体拥有相应的生物学功能，这将为进一步研究鸡gm-csf蛋白的生物学功能及其应用奠定基础。