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牲畜兽医学报 2011
口蹄疫o、asia1分型彩色胶乳试纸条诊断方法的建立, PP. 815-822 Keywords: 口蹄疫病毒,彩色胶乳,免疫层析,分型检测 Abstract: ?为建立一种快速、简便、直观的口蹄疫o、asia1分型彩色胶乳免疫层析的方法,作者选择2种不同颜色的单分散胶乳,将纯化的asia1/china/05流行毒株兔抗体制备蓝色免疫胶乳;将纯化的o/china/99流行毒株兔抗体制备红色免疫胶乳。将2种免疫胶乳分别喷涂于不同玻璃纤维上,晾干叠加制成彩色胶乳反应垫。再分别将纯化的asia1/yn/bsh/58/b和av99(l)标准毒株的豚鼠抗体固定于同一硝酸纤维素膜的不同区域上作为2条检测带。最后组装成口蹄疫o、asia1分型彩色胶乳试纸条。通过对阳性参考样品的检测,结果显示试纸条有很好的灵敏度,可检测到病毒含量为3.90×104ld50;在检测与口蹄疫临床症状相似病原,如猪水泡病病毒(svdv)、水泡性口炎(vs)、水泡性疹(ves)抗原时无交叉反应,特异性好;不同批次间、同一批次内的试纸条,在检测阴、阳性参考样品时,结果完全一致,说明试纸条重复性好;试纸条对检测已知血清型的74份田间样品的符合性试验中,o型、asia1型样品的阳性符合率分别为95.24%、96.30%,阴性样品符合率为100%。本试验研发的口蹄疫o、asia1分型彩色胶乳试纸条具有很好的灵敏度、特异性、重复性和符合性,而且可以通过不同颜色进行定型检测,适合国内流行的口蹄疫病原型别的分型检测。
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