鸡perilipin1抗血清制备及组织表达特性分析

？通过制备鸡脂滴包被蛋白（perilipin1）的抗血清,分析鸡perilipin1的组织表达特性并推测其在脂肪组织脂类代谢过程中发挥的功能。利用rt-pcr的方法扩增鸡perilipin1基因，并将其构建到含有his标签的表达载体pet-28a上。将阳性重组表达质粒pet-28a/perilipin1导入大肠杆菌bl21，在iptg诱导下产生his/perilipin1融合蛋白，对产生的his/perilipin1蛋白包涵体进行复性处理，复性后以其为免疫原制备鸡perilipin1多克隆抗血清。通过elisa和westernblot的方法检测抗血清的效价及特异性，并利用此抗血清分析鸡perilipin1在各种组织中的表达特性以及比较其在高、低脂系公鸡间的表达差异。elisa和westernblot结果表明，本试验获得了效价高、特异性强的鸡perilipin1抗血清，同时westernblot检测perilipin1的组织表达特性结果表明，perilipin1仅在鸡脂肪组织中表达，而在肝脏、十二指肠、胸肌、腿肌、肌胃、心脏、脾脏、肾脏等组织中未检测到表达信号；perilipin1在肉鸡高脂系脂肪组织中的表达量显著高于低脂系中的表达量（p<0.05）。结果表明，perilipin1的表达与肉鸡腹部脂肪的沉积具有密切的关系。