sybrgreeni荧光rt-pcr方法检测禽流感病毒

？为建立检测禽流感病毒（aiv）的sybrgreeni荧光rt-pcr方法，根据aiv的m基因保守区的核苷酸序列设计引物。用4株不同亚型的aiv感染mdck细胞，收集感染6、12、24、48、72h的病毒。另外采取169份鸡的泄殖腔拭子和咽喉拭子。对上述样品的m基因进行检测，试图建立快速检测aiv的sybrgreeni荧光rt-pcr方法，并与普通rt-pcr方法和传统的病毒滴定方法进行比较。结果表明：此次建立的检测aiv的sybrgreeni荧光rt-pcr方法能检测到感染mdck细胞后72h的aiv，对169份泄殖腔拭子和咽喉拭子中的aiv检出率为5.33%（9/169），而普通rt-pcr方法检出率为6.51%（11/169），病毒滴定检出率为5.62（9/160）。对其他病毒（ndv、ibdv、ibv、va）则未检测到，且整个检测过程只需4h，表明该方法特异、准确、快速。