牛肠道病毒2型的分离与鉴定

？本研究从北京某牛场发生严重腹泻的泌乳奶牛采集直肠拭子，接种mdbk细胞，分离获得1株病毒，命名为bj001。理化特性鉴定结果表明，该病毒大小约30nm，为无囊膜的rna病毒；用随机pcr方法对氯化铯梯度离心后的各区带扩增，扩增产物凝胶电泳后，回收“呈彗尾样拖带现象”最明显的区带2的500~1500bp的片段进行序列测定与分析，结果显示，扩增片段与genbank中已知的牛肠道病毒2型相似性较高；用bev2型特异性引物对病毒进行rt-pcr扩增，并将扩增产物进行序列测定与分析，结果表明，其与bev2相似性最高可达93%。故该病毒被确定为牛肠道病毒2型。将该病毒接种2头成年健康奶牛，均未出现肉眼可见的临床症状，但病毒可在接种奶牛体内持续存在，并产生较高滴度抗体。