应用cdna微阵列芯片技术筛选猪蛔虫性别差异表达基因的研究

？采用cdna微阵列芯片技术,从所构建的猪蛔虫雌、雄成虫cdna消减文库分别挑取1044和1119个克隆，pcr扩增其插入片段，经纯化后点样于预先处理好的基片上（双点杂交），制备成cdna微阵列芯片。将分别标记荧光素cy3-dutp和cy5-dutp的雌虫和雄虫cdna探针，与制备好的cdna芯片杂交（平行进行反标杂交试验）。根据每个点杂交后的ratio值，筛选出双点杂交和正反标中都同时具有表达差异的基因克隆共1559个。将表达差异最明显的前831个克隆进行测序，获得720个有效序列，经生物信息学分析发现，雄虫特异表达的主要精子蛋白和雌虫特异表达的卵巢信息蛋白的基因序列多数与新杆属线虫存在同源性，有31个可能是新的ests。性别差异表达基因及其相关生物信息的获得为下一步研究基因功能奠定了基础。