检测牛ifn-γ双抗体夹心elisa的建立及在牛结核病诊断上的初步应用

？本研究旨在建立牛ifn-γ体外释放法，为牛结核病的免疫学诊断提供一种快速、有效的新检测技术。分别以获得的牛ifn-γ单克隆抗体bo-mab1作为捕获抗体，以bo-mab2h作为检测抗体，建立了基于双抗体夹心elisa（das-elisa）的牛ifn-γ体外释放法。该方法的最低检出限为3.12ng？ml－1，可特异性检测出重组牛ifn-γ（bac-boifn-γ）及天然boifn-γ，而与猪、犬、鸡的天然ifn-γ无交叉反应。批内、批间变异系数小于5.11%。临床检测结果显示，与结核菌素皮内变态试验（tst）、进口bovigamtm试剂盒检测的符合率分别为88.7%和95.3%。结果表明，das-elisa法具有良好的敏感性、特异性及精确度，可用于临床样品的检测，为监测牛结核病特别是其早期感染提供了强有力的检测技术手段。