外源wnt3a对体外培养奶牛乳腺上皮细胞数量及frizzled1受体和β-catenin表达的影响

？旨在研究外源性重组wnt3a蛋白对奶牛乳腺组织中上皮细胞数量及其wnt信号通路中frizzled1受体和β-cateninmrna表达的影响。采用组织块法培养奶牛乳腺上皮细胞，western-blot方法对培养液中的β-酪蛋白进行鉴定。待组织块贴壁后，向培养液中分别加入0、10、25和50ng？ml-1的wnt3a蛋白，并收集培养至10d的细胞培养液和细胞。荧光定量pcr检测细胞中frizzled1受体和β-cateninmrna的表达量。结果表明：50ng？ml-1的wnt3a蛋白对增加乳腺上皮细胞数量的作用较明显，frizzled1受体mrna表达量显著增加，β-cateninmrna表达量与对照组间没有差异。结果提示，外源wnt3a能够影响体外培养奶牛乳腺上皮细胞frizzled1受体表达量，增加乳腺上皮细胞的数量，提示wnt信号通路可能参与乳腺组织生长发育的调控。