小反刍兽疫病毒h基因dna疫苗的构建及对小鼠的免疫原性

？旨在构建表达小反刍兽疫病毒(pprv)h蛋白的核酸疫苗，并评价其对小鼠的免疫原性。利用rt-pcr扩增了pprv的h基因并将其克隆到pcdna3.1（+）载体中，构建真核表达质粒pcdna3.1-h，然后转染鸡胚成纤维（cef）细胞，采用间接免疫荧光和westernblot检测h蛋白的瞬时表达情况。将重组质粒通过后腿肌肉注射的方式免疫balb/c小鼠，采用间接elisa、淋巴细胞增殖试验和细胞因子检测评价该dna疫苗的免疫效果，结果表明，成功构建了重组真核表达质粒pcdna3.1-h，并且能够在cef细胞中表达。免疫小鼠后，pcdna3.1-h能够诱导小鼠产生较高的特异性抗体水平，dna疫苗免疫组小鼠的脾淋巴细胞增殖试验刺激指数（si）均高于空载体和pbs免疫组，并且能够分泌较高水平的ifn-γ和il-4。因此，制备的dna疫苗免疫小鼠后可诱导体液免疫应答和细胞免疫应答，具有较好的应用前景。