可视化的rt-lamp方法检测禽白血病病毒

？本研究旨在建立一种快速检测禽白血病病毒（alv）的rt-lamp方法。根据genbank中alv序列，在其保守序列区域设计了多套lamp引物，通过lampreal-timeturbidimeter仪对alv的lamp引物、反应体系及反应进程进行监测和分析，以评价该方法的特异性和敏感性，并对加入sybrgreenⅰ肉眼判定与仪器监测结果进行比对。结果表明：建立的rt-lamp方法在63℃水浴中36min可对alv核酸进行高效扩增，在反应结束后加入sybrgreenⅰ肉眼判断结果与real-timeturbidimeter仪检测结果一致；该方法具有很强特异性，对其它相关鸡病病原检测结果均为阴性；其检出限量为14.2pg·μl-1，显示出很高的敏感性；用建立的lamp方法对24个样品进行检测，结果表明lamp法与其原检测结果基本一致；本研究建立了可对alv进行快速检测并可肉眼判定结果的可视化rt-lamp方法，其操作简便、无需昂贵设备，适用于alv的快速检测。