氟喹诺酮类抗菌药对临床分离猪链球菌的防耐药变异浓度测定及一步耐药突变株的筛选

？分别用微量肉汤稀释法（clsi规定的标准方法）和琼脂二倍稀释法测定了4种氟喹诺酮抗菌药（环丙沙星、恩诺沙星、氧氟沙星、甲磺酸培氟沙星）对临床分离的32株氟喹诺酮敏感的猪链球菌的体外最小抑菌浓度（mic）和防耐药变异浓度（mpc），比较二者的关系；分别与利血平和氰氯苯腙（cccp）联合用药，检测了各抗菌药突变选择窗（msw）内富集的一步耐药突变株是否存在主动外排泵机制；采用pcr和基因测序的方法检测在不同药物突变选择窗内筛选出的猪链球菌一步耐药突变株的dna回旋酶（gyra和gyrb）和拓扑异构酶iv（parc和pare）耐药决定区（qrdr）的基因突变和氨基酸序列变化，探明猪链球菌耐氟喹诺酮类药物的作用机制，分析不同氟喹诺酮药物在抑制猪链球菌时的特点，为临床用药提供依据。结果显示：4种药的mic90值从小到大依次为环丙沙星=恩诺沙星＜氧氟沙星＜甲磺酸培氟沙星，mpc90值从小到大依次为恩诺沙星＜氧氟沙星＜环丙沙星＜甲磺酸培氟沙星，选择指数（mpc/mic）除了环丙沙星为16外，其余药物均为2；只在环丙沙星的耐药突变窗内筛选到了耐药株，但其dna回旋酶（gyra和gyrb）和拓扑异构酶iv（parc和pare）耐药决定区（qrdr）没有碱基或氨基酸的突变；与利血平联合用药时检测到了外排机制。结论：环丙沙星在治疗猪链球菌感染时很容易筛选出一步耐药突变株，从而导致猪链球菌对其产生耐药性，耐药机制可能是由主动外排泵介导产生。