鸡传染性支气管炎病毒s1蛋白抗原表位的串联表达及间接elisa方法的建立

？本研究旨在建立一种快速、简便的鸡传染性支气管炎抗体的检测方法。通过生物信息学软件对传染性支气管炎病毒（ibv）zy3株的s1蛋白进行分析后，筛选出4段s1蛋白抗原表位优势区域（f1～f4），将4段表位串联成1条新基因f，对f基因编码的蛋白质进行二级结构预测，结果表明该蛋白抗原指数性高且具有良好的柔韧性。构建重组表达载体pet-32a(+)-f，并在原核表达系统中表达，获得大小为42ku的融合蛋白，经westernblot分析表明表达的串联蛋白具有良好的反应原性。以纯化的串联蛋白作为包被抗原，建立了一种检测ibv抗体的间接elisa方法。利用建立的elisa方法对采集来175份血清样品进行检测，并与商品化试剂盒进行对比，显示其阳性符合率为90.2%，阴性符合率为85.7%，总体符合率为89.7%，表明建立的elisa方法具有良好的特异性、重复性和敏感性。