山羊clock和cry1基因的克隆及其在大脑和垂体中表达差异的研究

？本研究旨在探讨生物钟基因clock和cry1在山羊出生后不同时期的大脑和垂体中的表达差异。在出生后30、60、90和120d共屠宰24只南江黄羊羔羊（公母各12只），取其大脑皮质层和垂体组织样品用于抽提rna，进行分子克隆和实时荧光定量pcr分析。结果，分离克隆得到了山羊clock基因外显子1到外显子8以及cry1基因外显子6到外显子15的cds区序列，其长度分别为1479bp和993bp，其中clock基因部分cds区序列与绵羊、牛、人和小鼠的对应序列相似性分别为99%、90%、94%和92%，cry1基因部分cds区序列与绵羊、牛、人和小鼠的对应序列相似性分别为99%、98%、94%和87%。组织表达分析结果表明，性别对clock和cry1基因的表达影响不显著（p>0.05），2个基因在垂体中的mrna表达量极显著高于大脑中的表达量（p<0.01）；在不同时期的垂体组织中，clock和cry1基因表达量均呈现先上升后下降的趋势；在不同时期的大脑组织中，clock基因的表达量趋于波动平衡，呈现上升趋势，cry1基因的相对表达量呈细微的上升趋势。结果提示：clock和cry1基因的cds区在物种间保守性较高。clock和cry1基因在山羊大脑和垂体组织中起到重要的作用，且其mrna发育性表达模式具有组织特异性。