猪细小病毒和猪圆环病毒2型二重液相芯片检测方法的建立

？作者拟建立检测猪细小病毒（ppv）和猪圆环病毒2型（pcv2）的二重液相芯片（xmap）检测方法，以满足出入境检疫和临床高通量检测的要求。依据genbank中ppv结构蛋白vp2基因及pcv2全基因序列，设计ppv和pcv2特异性探针、引物及探针互补序列，将探针与磁性微球偶联，对下游引物和探针互补序列标记生物素，采用不对称性二重pcr扩增靶序列，将pcr产物与偶联好的探针进行杂交，用液相芯片仪进行检测。通过对检测条件优化，建立检测ppv、pcv2两种病毒的二重液相芯片技术，并对临床样本进行检测。建立的ppv和pcv2二重液相芯片检测方法，特异性良好，该方法对ppv和pcv2基因拷贝数检测下限分别为1.53×104、2.58×102；对56份临床样品检测表明，该方法与单项pcr检测结果符合率为100%。成功建立了ppv、pcv2二重xmap检测方法，该检测技术可用于出入境检疫和兽医临床检验。