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牲畜兽医学报 2012
转乳铁蛋白肽和α干扰素基因的牛胎儿成纤维细胞的制备Keywords: 乳铁蛋白肽,α干扰素,转基因,牛胎儿成纤维细胞 Abstract: ?旨在构建含有乳铁蛋白肽基因和α干扰素基因的载体,并制备转基因牛胎儿成纤维细胞,为研制抗乳房炎和口蹄疫转基因克隆牛提供供体细胞。本研究构建了由山羊β-酪蛋白启动子启动的牛乳铁蛋白肽基因和由cmv启动子调控的人α干扰素基因的载体,以egfp基因作为报告基因,neo基因作为筛选基因;分别采用脂质体和电击法转染牛胎儿成纤维细胞,g418筛选得到转基因阳性细胞,并用pcr方法检测转基因细胞中目的基因的整合情况,用westernblotting检测α干扰素蛋白的表达。结果,得到了同时含有牛乳铁蛋白肽基因和人α干扰素基因的转基因牛胎儿成纤维细胞,并且α干扰素蛋白在转基因细胞中能有效表达。
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