猪肺炎支原体p216基因片段的表达及黏附活性研究

？本研究旨在研究猪肺炎支原体p216蛋白的黏附活性并初步建立猪肺炎支原体蛋白黏附模型。根据软件分析和文献报道从p216全基因中选取亲水性、抗原性、黏附性较好的目的片段，利用pcr从mhpnj株扩增p216基因片段，克隆到表达载体pet32a(+)中，获得重组质粒pet32a(+)/p216，经iptg诱导获得重组蛋白，通过westernblot和间接免疫荧光试验检测重组蛋白的免疫原性及黏附活性。结果表明，pcr扩增的目的基因大小为l636bp；sdspage检测重组蛋白相对分子质量为80.1ku；westernblot检测表明重组蛋白能与mhp阳性血清发生特异性反应；间接免疫荧光试验表明该蛋白对猪肺炎支原体黏附sjpl细胞产生占位抑制作用。结果提示，p216蛋白具有良好的黏附活性，能黏附sjpl细胞，从而为猪肺炎支原体其他黏附因子的研究奠定基础。