重组牦牛肌肉生长抑制素成熟肽的纯化及其免疫原性研究

？为了探索牦牛mstn的作用机制，寻找合适的阻断mstn活性的方法，最终实现牦牛的高效率育肥，本研究采用rtpcr方法克隆牦牛mstn成熟肽基因，构建mstnpet28a(+)重组表达载体，进而在e.colibl21（de3）宿主菌中进行表达，将表达产物用亲和层析纯化，最后用elisa方法检测牦牛mstn重组成熟肽的免疫原性。重组载体中连接的牦牛mstn成熟肽基因包含330bp，编码109个氨基酸。含mstnpet28a(+)重组载体的工程菌经0.1mmol·l-1iptg诱导表达6h后，mstn成熟肽的表达量约占蛋白总量的21%，总蛋白经亲和层析纯化后得到了高纯度的牦牛mstn重组成熟肽，分子量约16.5ku；elisa结果显示，兔抗牦牛mstn重组成熟肽的血清效价为32000个抗体单位，表明牦牛mstn重组成熟肽具有较好的免疫原性。本研究建立了牦牛mstn重组成熟肽高效表达系统并纯化获得具有免疫原性的牦牛重组mstn成熟肽，这为通过调控mstn功能来改良牦牛产肉性能的研究储备了技术条件。