猪精子获能前后细胞亚组分蛋白分离及酪氨酸磷酸化蛋白的鉴定

？本研究对猪精子获能前后细胞亚组分蛋白进行分离以及对酪氨酸磷酸化蛋白进行鉴定，旨在为哺乳动物精子受精生物学研究奠定理论基础。利用动物精子体外获能培养、细胞亚组分分离技术及蛋白免疫印迹的方法，分离猪精子细胞亚组分蛋白及酪氨酸磷酸化蛋白鉴定。结果表明，猪精子经过获能培养后各项活力指标均得到显著提高，且与精子蛋白发生酪氨酸磷酸化修饰密切相关；获能精子中126、108、79ku的高分子量蛋白磷酸化程度明显高于未获能精子；分子质量约为25、47、50ku的膜蛋白及47ku胞浆蛋白发生酪氨酸磷酸化，其中25、47ku的膜蛋白酪氨酸磷酸化程度显著高于未获能精子（p<0.05）；分子量约为23、37、42～50ku的核蛋白发生酪氨酸磷酸化，获能精子中23ku的核蛋白酪氨酸磷酸化程度显著高于未获能精子（p<0.05）。结果提示，猪精子细胞不同亚组分中，发生酪氨酸磷酸化修饰的蛋白以膜蛋白及核蛋白为主，同时有少量的胞浆蛋白。