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牲畜兽医学报 2012
应用噬菌体展示技术筛选兔出血症病毒抗原模拟表位, PP. 1281-1286 Keywords: 兔出血症病毒,单克隆抗体,噬菌体展示技术,模拟表位 Abstract: ?以抗兔出血症病毒(rhdv)的单克隆抗体a3c作为靶物质,应用噬菌体展示技术筛选rhdv抗原表位。将纯化的单抗a3c包被固相载体,经3轮亲和筛选后,挑取25株噬菌体单克隆并扩增,用elisa测定后,提取阳性克隆单链dna并测序,用阳性噬菌体克隆免疫小鼠制备高免血清,检测筛选抗原表位的免疫原性。结果表明:3轮亲和筛选后,特异性噬菌体克隆得到了有效富集,25株噬菌体单克隆中有19株为阳性克隆;测序结果表明,获得了与抗原高度同源的序列gtddmdpgttaa,即抗原的模拟表位,其中,氨基酸基序dxxdp为表位中的核心氨基酸;制备的小鼠高免血清与抗原具有较好的反应性,阳性噬菌体克隆与兔rhdv高免血清也具有较好的反应性。因此,该表位具有良好的免疫原性和反应原性。该研究为rhdv抗原表位的研究和新型疫苗的探索积累了资料。
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