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牲畜兽医学报 2012
猪源多杀性巴氏杆菌pcr鉴定方法的建立, PP. 1111-1116 Keywords: 多杀性巴氏杆菌,plpe,16srrna,pcr,检测 Abstract: ?为建立一种灵敏、特异的猪源多杀性巴氏杆菌pcr检测方法,根据genbank已公布的多杀性巴氏杆菌plpe基因序列的保守片段设计合成引物,经plpe基因阳性质粒构建、反应条件的优化、特异性试验和敏感性试验,对猪源多杀性巴氏杆菌特异性pcr检测方法进行了研究;并将该pcr方法用于检测来自四川省6个规模化猪场的64份疑似多杀性巴氏杆菌肺部组织样品。结果显示,建立的pcr方法具有良好的特异性和敏感性,检测的敏感性为5×101拷贝的目的基因;多杀性巴氏杆菌(a、b、d血清型)pcr均为阳性、app和hps等病原均为阴性;64份临床疑似样品中检出36份样品阳性,阳性检出率为56.2%。以plpe基因初步建立的多杀性巴氏杆菌pcr检测方法具有较好的特异性、重复性、敏感性和可靠性,可用于多杀性巴氏杆菌的检测鉴定。
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