苹果酸酶在葡萄糖和胰岛素诱导鹅肝脂肪变性中的作用研究

？本研究旨在研究不同浓度葡萄糖和胰岛素诱导鹅肝脂肪变性过程中苹果酸酶（malicenzyme,me）的活性及其mrna表达情况，以探讨me在鹅肝脂肪变性中的作用。根据鸡me基因序列保守区设计引物，通过rtpcr、克隆测序等技术扩增鹅me基因；分离、培养四川白鹅原代肝细胞，添加不同浓度葡萄糖和胰岛素诱导肝细胞脂肪变性，检测细胞内甘油三酯（tg）含量、me活性及其mrna表达情况。结果发现，鹅me基因跟原鸡同源性最高；与对照组相比，葡萄糖及其与胰岛素协同作用均能显著促进肝细胞内甘油三酯（tg）沉积，且呈现出剂量递增效应，而胰岛素对细胞内tg含量影响不明显；与对照组比较得出：me的活性和mrna表达水平随着葡萄糖浓度升高而增加，30mmol·l-1葡萄糖具有明显的促进作用（p＜0.05）；低浓度（50nmol·l-1）胰岛素显著增加me的活性和mrna表达水平（p＜0.05），当胰岛素浓度达到200nmol·l-1时，me的活性和mrna表达水平受到一定抑制；葡萄糖和低浓度胰岛素（50nmol·l-1）协同能促进me的活性和mrna表达水平。本研究扩增获得了鹅me基因部分序列，且发现葡萄糖和胰岛素协同可以增强me的活性和mrna表达水平，从而显著增加肝脏中tg的含量，诱导鹅肝脂肪变性。