雏鸭肝炎病毒侵染下肝脏消减cdna文库的构建及差异基因筛选

？本研究通过构建雏鸭肝脏消减cdna文库，旨在筛选并鉴定与雏鸭病毒性肝炎相关的基因，对相关基因进行功能聚类分析进而探究其作用机理。利用抑制性消减杂交（suppressionsubtractionhybridization，ssh）技术构建3日龄健康全同胞金定鸭人工感染雏鸭肝炎病毒（duckhepatitisvirus，dhv）与同期注射等量生理盐水差异表达基因的sshcdna文库。对其中563个阳性克隆进行测序，共获得299条差异表达序列标签(expressedsequencetags,ests)。去除冗余的cdna序列载体并聚类拼接后，进行核酸和蛋白质同源性的比较和功能聚类分析。结果表明：有70个不同的基因与ests具有高度的同源性（e值＜e-10，匹配长度>150bp，匹配度＞80%），且多数基因与细胞组分合成、信号转导以及病理状态下的生物学调控过程相关。i型雏鸭病毒性肝炎的发生和发展是多基因多步骤的复杂过程，该结果为深入研究雏鸭肝炎病的分子调控机制提供基础。