猪血管内皮细胞中与猪瘟病毒相关microrna的初步筛选

？本试验旨在筛选猪脐静脉血管内皮细胞（suvecs）内作用于猪瘟病毒（csfv）的microrna。通过构建csfv3′和5′非翻译区（untranslatedregion,utr）的双荧光素酶报告基因载体，经生物信息学预测可能与csfv相互作用的microrna，然后瞬时共转染重组载体与microrna的抑制物，最后通过发光检测仪测定荧光素酶活性。结果表明，成功构建了csfv5′非翻译区（373bp）和3′非翻译区（252bp）的报告基因载体，并合成了4条预测出的microrna（ssc-mir-let7c、ssc-mir-106a、ssc-mir-18、ssc-mir-139）的抑制物，共转染后发光检测仪检测到荧光素酶的活性被不同程度抑制。本研究发现microrna作用位点主要在csfv的3′utr，而且以上4种microrna都对csfv3′utr有不同程度的抑制作用，其中ssc-mir-18的抑制作用比较明显。