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牲畜兽医学报 2010
tsa对滩羊成纤维细胞作为供体细胞的作用, PP. 410-416 Abstract: ?为探索成纤维细胞作为供体细胞的潜能和trichostatina(tsa)处理供体细胞的适合浓度,提高克隆胚胎的发育水平。本研究分别利用100、50、25、10ng·ml-1tsa处理滩羊成纤维细胞,观察细胞形态,统计细胞活率,利用流式分选技术分析处理前后细胞的周期时相,同时通过间接免疫荧光法检测细胞乙酰化水平,并以经过10~50ng·ml-1tsa处理的成纤维细胞作为供体细胞,检测其重构胚发育水平。结果发现,当tsa的浓度达100ng·ml-1时,细胞大量死亡,不同浓度tsa处理细胞24h后,细胞周期被明显抑制在g0/g1期,乙酰化水平明显高于对照组,其中供体细胞经10ng·ml-1tsa处理的克隆胚胎卵裂率和囊胚率明显升高(p<0.05,(85.2±3.4)%vs(68.6±6.7)%,(35.6±5.7)%vs(10.4±8.3)%)。结果表明,经10ng·ml-1tsa处理的滩羊成纤维细胞周期同步化明显,乙酰化维持较高水平,重构胚胎发育水平明显提高,适合作为成纤维细胞的处理方法和浓度。
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