牛gdf5基因启动子的克隆与序列分析

？旨在了解生长分化因子5（gdf5）可能的调控序列。本研究通过基因组比对，扩增了牛gdf5基因5′侧翼区，并通过产物纯化、连接、转化及测序比对，确定了2043bp的启动子序列。同时综合考虑已经证实的人gdf5基因启动子结构及应用启动子在线分析软件，对该序列进行分析。结果发现，牛gdf5基因5′侧翼区没有cpg岛，序列比对发现，牛和人gdf5基因启动子区域同源性为78%；牛gdf5基因启动子没有tatabox或caatbox结构，其转录起始位点位于翻译起始密码子atg上游－359bp位置，其潜在的转录因子有amlla，ap1，amlla，cdxa，sry，cdxa，tata，amlla，gtata1，mzf1，cdxa，nkx2，cdxa，s8和sry，其中ap1，amlla，sry，nkx2，s8和sry高度保守，与人的序列完全一致；推测发现牛gdf5基因启动子－457至－423bp序列中的gt重复序列可以增强启动子的活性，且最小增强子处于－458和－377bp之间。研究结果推测判定了牛gdf5基因启动子的转录起始位置、转录结合位点、活性序列及最小增强子序列，为以后深入研究gdf5基因在牛软骨细胞中的表达机制提供了理论基础。