小鼠tle4基因启动子克隆及分析

？本研究旨在初步对小鼠tle4基因的转录调控机制进行探讨。利用pcr方法扩增tle4基因5′上游启动区2849bp(-2521bp～+327bp)的片段，然后通过步移缺失获得了7段长度不等的启动子片段并分别克隆到荧光素酶（luc）报告基因表达质粒中。通过双荧光素酶报告活性分析检测tle4基因启动子区不同长度片段在小鼠畸胎瘤细胞（f9）及小鼠胚胎干细胞（es）中瞬时转染后的活性。2种细胞的检测结果显示，在tle4基因启动子区（-2521bp～-2137bp）存在负性调控元件，而在启动区（-2137bp～-1794bp）活性最强。对tle4基因启动区（-2137bp～-1794bp）进一步缺失分析发现在该基因启动区（-2027bp～-1927bp）活性较强，分析预测该序列含有一个功能性的（hsf）的结合位点。结果推测hsf对tle4基因的表达调控及功能行使具有重要作用。