新生仔猪小肠上皮细胞的分离培养和鉴定

？为更快捷地进行猪肠道病毒性、细菌性疾病及细胞永生化的研究提供便利，本研究使用多种酶消化法及其他培养法尝试分离培养肠上皮细胞。结果，利用组织块培养法能成功建立新生仔猪小肠上皮细胞株，获得的上皮细胞具有较强的增殖能力，22h内贴壁并发生细胞分裂，6～7d明显增殖，10～12d汇合成单层，连续传代培养至12代，细胞基本失去上皮样特征。倒置显微镜下观察，10代前培养细胞为多角状或卵圆形，单层生长不重叠，呈铺路石状排列，11～12代细胞发生变形，间隙增大。细胞角蛋白18鉴定二者均为阳性。电镜下，纹状缘整齐，紧密连接结构清晰可见。结果表明利用组织块培养法可以获得能够连续传代、活力较好的猪小肠上皮细胞。