跨膜蛋白66生物信息学分析及其突变体转基因小鼠构建

？跨膜蛋白66（tmem66）是与细胞凋亡以及癌症发生密切相关的重要功能基因，为了在个体水平研究其生物学功能，我们进行了tmem66基因突变体（tmem66v）转基因小鼠的构建。本研究通过原核注射法进行转基因操作，将获得的312个受精卵移植到13只代孕母鼠中，运用pcr、southernblotting对出生的小鼠进行转基因鉴定，对于转基因阳性小鼠通过传代试验研究外源基因是否稳定整合，并通过反向pcr方法研究外源基因的整合方式。结果显示在出生的55只小鼠中有6只为转基因阳性，其中3只转基因小鼠可以稳定传代，表明这些小鼠中外源基因发生了稳定整合。反向pcr检测结果发现外源片段是以串联重复的方式整合到转基因小鼠的基因组中。本研究成功构建了tmem66基因突变体转基因小鼠，为进一步研究tmem66基因的功能奠定了基础。