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牲畜兽医学报 2010
猪fcγrⅰ真核表达载体的构建及稳定表达细胞系的建立, PP. 909-914 Keywords: 猪fcγrⅰ受体,共转染,marc-145细胞 Abstract: ?本研究旨在建立稳定表达猪fcγrⅰ的marc-145细胞系。从猪肺泡巨噬细胞中提取总rna,应用rt-pcr技术获得猪fcγrⅰ和γ链cdna,并分别构建pireshyg3-γ和pcdna3.1-fcγrⅰ真核表达质粒;用脂质体共转染marc-145细胞,经潮霉素b(300μg·ml-1)和g418(400μg·ml-1)共筛选获得稳定表达猪fcγrⅰ的细胞系;运用rt-pcr、玫瑰花环和流式细胞术对细胞系进行鉴定。结果表明成功构建了猪fcγrⅰ和γ链真核表达载体,建立了稳定表达猪fcγrⅰ的细胞系,且表达于转染细胞表面的pofcγrⅰ受体分子能与猪igg特异结合。本研究为进一步研究奠定了基础。
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