牛传染性鼻气管炎病毒gc蛋白单克隆抗体的制备与初步应用

？为制备牛传染性鼻气管炎病毒(ibrv)gc蛋白的特异性单克隆抗体，并分析其免疫学特性，以原核表达并纯化的重组gc蛋白为免疫原注射免疫balb/c小鼠，取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合。建立间接elisa方法筛选分泌gc蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞，获得1株能稳定分泌gc蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，命名为3d6。3d6的亚类为igg1型，轻链为κ链；上清、腹水抗体效价分别为6.4×103、1.28×105；westernblot和间接免疫荧光试验表明该单克隆抗体能识别牛gc蛋白。利用3d6细胞株分泌的单克隆抗体建立了检测ibrv的双抗体夹心elisa方法，结果证明，该方法特异性和敏感性良好，为快速诊断ibrv和研究gc蛋白功能奠定了基础。