天祝白牦牛肾组织成纤维细胞系的建立与生物学特性研究

？采集天祝白牦牛胚胎肾组织，用胰蛋白酶热消化法制备原代细胞，通过差速消化和差速贴壁法继代培养和细胞纯化，扩增至f3代后冷冻保存，并对复苏细胞的形态、活力、生长曲线、荧光蛋白质粒转染表达、核型以及乳酸脱氢酶同工酶等生物学特性进行了分析。结果显示，原代和传代细胞生长形态良好，群体倍增时间为27.2h；染色体2n=60；二倍体为74%，占主体；乳酸脱氢酶同工酶电泳图谱有明显特征，ldh5浓度较高，活性较强；外源质粒在该细胞中能进行复制和表达；细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。表明本研究已成功建立天祝白牦牛肾组织成纤维细胞系，该细胞系的建立，使天祝白牦牛这一国家重要种质资源在细胞水平上得以保存，也为基因组文库和体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。