荧光定量rt-pcr检测鸡cd4、cd8基因表达水平

？白细胞分化抗原cd4和cd8在机体免疫应答及其信号传递过程中发挥着重要作用。本试验建立了定量检测鸡cd4和cd8mrna表达水平的sybrgreeni实时荧光定量rt-pcr（rrt-pcr）方法，并采用该方法对26～50日龄商品鸡外周血淋巴细胞（pbl）中cd4和cd8mrna表达水平进行了检测。结果显示：所建立的rrt-pcr对cd4和cd8mrna的扩增效率分别为93%和91%；线性范围分别在10-4～10-9和10-3～10-9；相关系数分别为0.9980和0.9999；最低分别能检测105和120拷贝；熔解曲线分别在78.2和86.7℃附近出现1个单特异峰；组内变异系数分别在1.13%～2.15%和1.17%～3.68%，组间变异系数分别在1.16%～3.25%和1.66%～2.86%。26～50日龄鸡pblcd4和cd8的mrna表达水平有小幅波动，与采用流式细胞术检测结果的报道一致。本试验建立的rrt-pcr方法敏感性高、稳定性和再现性好，为检测鸡cd4、cd8基因表达水平提供了精确定量的新方法。